Nano ITC
Calorimetria de Titrare Izoterma (ITC) este o tehnica fizica utilizata pentru determinarea parametrilor termodinamici ai interactiilor chimice. Cel mai adesea este utilizata pentru studiul legarii moleculelor mici (cum ar fi compusii medicali) de macromolecule mai mari (proteine, DNA, etc.)
Masuratori termodinamice
ITC este o tehnica cantitativa ce poate masura direct afinitatea chimica (Ka), variatia entalpiei (ΔH), si stoechiometria interactiilor (n) intre doua sau mai multe molecule in solutie. Din aceste masuratori initiale pot fi determinate variatia energiei Gibbs (ΔG), si variatia entropiei (ΔS), utilizand relatia de mai jos:
ΔG = -RTlnK = ΔH-TΔS
(unde R este constanta lui Roberts iar T este temperatura absoluta).
Un calorimetru cu titrare izoterma este compus din 2 celule identice confectionate dintr-un material cu conductivitate termica foarte inalta cum ar fi hastelloy sau aur, cu o captuseala adiabata. Circuitele termopila/termocuplu foarte sensibile sunt utilizate pentru detectarea diferentei de temperature intre celula de referinta (umpluta cu buffer sau apa) si celula probei continand macromolecula. Inainte de aditia ligandului, o putere constanta (<1 mW) este aplicata celulei de referinta. Aceasta directioneaza un circuit de feedback, activand un dispozitiv de incalzire localizat in celula de proba. In timpul derularii experimentului, ligandul este titrat in celula probei in parti alicote, generand fie absorbtie fie degajare de caldura (in functie de natura reactiei). Masuratorile constau in aplicarea ca functie de timp a unei puteri necesare pentru mentinerea unei temperature egale intre celula de proba si cea de referinta.
Intr-o reactie exoterma, temperature in celula de proba creste imediat dupa adaugarea ligandului. Aceasta favorizeaza descresterea puterii de feedback aplicata celulei cu proba (e important de retinut: o putere de referinta este aplicata celulei de referinta) cu scopul mentinerii temperaturii egale intre cele doua cellule. In reactia endoterma, se intampla contrariul: circuitul de feedback creste puterea aplicata in scopul mentinerii temperaturii egale intre cele 2 celule (operatie izoterma).
Observatiile sunt reprezentate grafic in μcal/sec necesare mentinerii referintei si probei la o temperatura identica. Aceasta putere este data ca o functie de timp (secunde). Ca rezultat, datele neprelucrate vor consta intr-o serie de pulsuri ale fluxului termic (puterii) cu fiecare puls avand corespondent intr-o injectie a ligandului. Aceste pulsuri sunt integrate apoi in timp, avand ca rezultat efectul termic total per injectie.
Nano ITC2G
Performante:
- Domeniu de Temperatura: 2 … 80°C
- Stabilitatea Temperaturii: ±0.0002°C la 25°C
- Stabilitatea liniei de baza: 0.02 μW/hr
- Nivel distorsiune: 0.004μWatt
- Timp de raspuns: 15 secunde
- Volum celula: 1.0ml
- Material celula: aur 24K (Hastelloy-C Optional)
- Seringi de Titrare de precizie: 100μl si 250μl
- Incremente Volum: 1-15 μl
Advantaje Nano ITC2G:
- Stabilitate imbunatatita a liniei de baza, asigurand date ITC de cea mai mare calitate
- Influenta redusa a fuctuatiilor termice datorate ambientului ce imbunatatesc flexibilitatea si fiabilitatea instrumentului.
- Arhitectura imbunatatita de sensibilitate a temperaturii asigurand controlul precis al instrumentului si functiile de achizitie a datelor
- Raport Semnal/Zgomot imbunatatit, ceea ce creste sensibilitatea instrumentului
- Timp mai scurt pentru echilibrare si start experiment
Aplicatii Nano ITC2G:
- Interactii Proteina-Proteina
- Biologie Structurala
- Interactii Drog-Proteina
- Descoperire Droguri
- Evaluare Variante Proteine
- Optimizare avans de faza
- Reactii de Legare Anticorpi
- Reactii de Legare Molecule Mici
- Legari Drog-DNA
- Evaluari CMC